Kvalitativ analyse for hepatitis C

Efterlad en kommentar 9.080

En kvalitativ analyse af polymerasekædereaktionen - PCR for hepatitis C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet af HCV i kroppen. Under laboratoriebetingelser studeres strukturen af ​​RNA, som vil omfatte virussen. I tilfælde af detektering af virus C er det nødvendigt at gennemgå et behandlingsforløb, da leverens forsømte tilstand vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR af høj kvalitet udføres også efter genopretning for at bekræfte fraværet af antistoffer. Tildelt til rutinemæssig inspektion. Med en lav koncentration af det forårsagende middel i blodet kan PCR (kvalitativ) muligvis ikke registrere noget, fordi diagnosesystemet har sine egne følsomhedstærskler. I tilfælde af sygdoms første fase eller den milde form udføres PCR ultradiagnostik på ultrafølsomt udstyr.

Hvad er RNA-virus?

Betegnelsen RNA i hepatitis C-viruset (eller hepatitis C-virus-RNA) er selve leversygdommen. Virus C binder sig til den sunde celle i kroppen ved at trænge ind indeni. Over tid, spredt gennem hele kroppen, er det kun nødvendigt at komme ind i blodet. Som et resultat trænger patogenet i leveren, smelter sammen med sine celler og virker hårdt. Leverceller (hepatocytter) arbejder under indflydelse, undergår ændringer, og derved dør de. Jo længere virus C er i leveren, desto større er antallet af celler der dør. Over tid udvikle farlige sygdomme, der fører til ondartet degeneration og død.

Infektion af leveren med denne type virus kan ikke manifestere sig eksternt. I mange år eller årtier føles en inficeret person helt sund, og kun en tilfældig undersøgelse afslører oftest patologi. Ved donering af blod til hepatitis undersøges en del af RNA-kæden (ribonukleinsyre), som er en del af det humane gen (DNA). Resultaterne af laboratorieprøver bør ikke anvendes til selvbehandling, da dette kun er en indikator. Det præcise billede og yderligere diagnose er bedre bestemt af lægen.

Når det er færdigt: Indikationer for forskning

I bekræftelse af HCV udføres PCR-analyse (polymerasekædereaktion). Undersøgelser af PCR hjælper med at finde patogenmaterialet i strukturen af ​​RNA og ordinere en effektiv terapi. Udpeget i følgende tilfælde:

  • påvisning af tegn på betændelse i leveren
  • screening undersøgelser for forebyggelse;
  • undersøgelse af personer i kontakt
  • diagnose af hepatitis af blandet oprindelse (bestemmelse af hovedpatogenet);
  • bestemmelse af niveauet for reproduktionsaktivitet for viruset i kronisk form
  • levercirrhose
  • at bestemme effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling.
Studier af PCR er ordineret af en læge for at bestemme effektiviteten af ​​et behandlingsforløb for hepatitis.

Der er en kvalitativ såvel som kvantitativ analyse af PCR. Kvantitativ PCR viser procentandelen af ​​RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse af Hepatitis C RNA) har også behov for kvantitativ forskning. Et højt koncentrationsniveau af det forårsagende middel til hepatitis C er forbundet med risikoen for dets transmission, det vil sige infektion af andre. Lavt tal er bedre behandles. Mængden af ​​RNA-vira i blodet er ikke relateret til intensiteten af ​​sygdommen. PCR-analyse udføres også ved interferonbehandling for at ordinere behandlingens varighed og kompleksitet.

Funktioner af høj kvalitet PCR analyse for hepatitis C

En kvalitativ analyse med polymerasekædereaktionsindekset er tildelt alle patienter, der har antistoffer mod hepatitis C i deres blod. De, der har været syge og genvundet, skal tage testen igen. Det anbefales at bestå testen for hepatitis B, så i tilfælde af positiv konklusion og for hepatitis D. Også kvalitativt analyseret reaktion skal udføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser viser et komplet billede af viral spread.

Fra testresultaterne vil kun en positiv test for hepatitis C være synlig eller negativ, dvs. tilstedeværelsen eller fraværet af en virus. Hvis udgangen er "detekteret", er viruset og fortsætter med at være aktivt. Betegnelsen "ikke registreret" angiver fraværet af en virus eller dens lille mængde. Med denne indikator skal man huske på, at diagnostiske systemers analytiske følsomhed er forskellig, og at RNA hepatitis C stadig kan være i blodet, men ikke manifesteret i analysen.

Særligt følsom PCR metode afslører ultra hepatitis C selv i små mængder. En fluorescenshybridiseringsundersøgelse anvendes, hvilket er mange gange højere end standard PCR-systemer. Metoden bruges i flere tilfælde:

  • mistænkte skjulte former for hepatitis C;
  • PCR-diagnostik bekræftede ikke patogenet, men der er antistoffer;
  • i tilfælde af nyttiggørelse
  • at opdage tidlig infektion.
Tilbage til indholdsfortegnelsen

Dekodningsanalyse

PCR-dekodningen af ​​HCV påvirker den endelige beslutning, når der laves en diagnose, især med ultrametoden. Den største ulempe ved denne undersøgelse er streng overholdelse af sterile betingelser for prøven og materialerne. En lille afvigelse viser nogle gange unøjagtige analytiske konklusioner, komplicerer diagnoser og efterfølgende behandling. Analyse af PCR til bestemmelse af hepatitis-RNA viser ikke altid selvtillid et billede af sygdommen, undertiden er unøjagtigheder tilladt, og i begge retninger.

Diagnosticering af hepatitisvirus, det anbefales at anvende en omfattende undersøgelse.

Norm for indikatorer

Fraværet af JgM antistoffer mod viral hepatitis C i resultaterne af undersøgelsen betragtes som normen i analysen af ​​polymerasekædereaktionen. Samtidig viser resultaterne af den serologiske analyse tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod C-viruset, og dette ligger også inden for det normale område. En kvalitativ definition viser ikke intensiteten af ​​sygdommen, den afslører kun årsagsforbindelsen til hepatitis C i RNA. Denne analyse gentages efter behandling for at bekræfte den faktiske genopretning.

afvigelser

Hvis JgM antistoffer mod HCV RNA er til stede, indikerer dette en udviklingsinfektion. Sygdommen på samme tid fortsætter akut eller kronisk, manifesteret i forskellige stadier. Hvis der registreres et fald i antallet af antistoffer, vil analysen indikere, at resultaterne af behandlingen blev opnået under genopretningen. Der findes kun yderst sjældne tilfælde af falske positiver i diagnosen. De findes hos kvinder under graviditet og hos mennesker med andre smitsomme sygdomme.

Omkostningerne ved blodprøvning og PCR for hepatitis C

Hepatitis C er en inflammatorisk patologi, hvor leverceller påvirkes. Sygdommen udvikler sig som følge af indtrængningen af ​​hepatitis C-viruset (HVC) i menneskekroppen.

Formen af ​​sygdommen kan være akut eller kronisk.

Ofte er symptomerne på den akutte form for patologi hos de fleste patienter fraværende. Sommetider er sygdommen ledsaget af smertefulde fornemmelser i underlivet, nedsat ydeevne, øget træthed, appetitløshed, mørk skygge af urin, misfarvning af fæces, hudlindhed og slimhinder, ledsmerter. Sådanne symptomer opstår normalt 6-8 uger efter infektion, men kan forekomme efter seks måneder.

Ved udviklingen af ​​sådanne fænomener er det nødvendigt at kontakte en medicinsk institution og gennemgå en omfattende undersøgelse af hele organismen. Som led i en lægeundersøgelse udføres en blodprøve for hepatitis C.

I dag kan denne patologi ved hjælp af moderne diagnostiske teknikker identificeres i den indledende fase af udviklingen, hvilket i høj grad øger chancerne for en fuldstændig helbredelse af sygdommen.

Følgende grupper af mennesker skal teste for hepatitis C:

  • kvinder i perioden med at bære et barn;
  • personer med tegn på hepatitis
  • medicinsk personale;
  • potentielle organ- og bloddonorer;
  • narkomaner, HIV-inficerede personer, promiskuøse intime liv.

Liste over krævede undersøgelser

Hvilke tests skal jeg tage for hepatitis C? For nøjagtigt at diagnosticere sygdommen, identificere dens årsager og bestemme tilstanden af ​​leveren parenchyma, er følgende undersøgelser påkrævet:

  • generelle urin og blodprøver;
  • biokemisk analyse af blod;
  • PCR analyse;
  • blodprøve til påvisning af antistoffer mod HVC;
  • en blodprøve for eksisterende antistoffer mod sine egne leverceller
  • leverbiopsi.

Afkodning af blodprøver for hepatitis C udføres af en specialist. Overvej hver forskningsmetode mere detaljeret, og vi vil forstå, hvilken analyse af hepatitis C, der er den mest præcise.

Generel analyse

Når du udfører en generel blodprøve for hepatitis C, kan du evaluere patientens tilstand. Ændringer i blodparametre opfattes ikke som specifikke symptomer på hepatitis, men med denne sygdom er der sådanne lidelser som:

  • nedsat koncentration af hæmoglobin, blodplader og leukocytter
  • øger indholdet af lymfocytter
  • blodkoagulering er overtrådt
  • erythrocytsedimenteringshastigheden (ESR) stiger.

Generel analyse af urin gør det muligt at detektere urobelin i dets sammensætning - et galdepigment, der opstår i urinen som følge af nedsat leverfunktion.

Biokemisk analyse

Biokemisk analyse af blod i hepatitis C gør det muligt at identificere sådanne lidelser som:

  • forhøjede niveauer af leverenzymer (alanintransaminase - ALT og aspartataminotransferase - AST), som indtræder i blodet, når hepatocytter er beskadiget. I en normal tilstand bør disse indikatorer for mænd ikke være over 37 IE / l, for kvinder - ikke højere end 31 IE // l. En øget koncentration af ALT og AST i asymptomatisk hepatitis C er ofte det eneste symptom på denne sygdom. Derudover øges blodglutamyltranspeptidasens alkaliske phosphatase i blod (normalt ikke højere end 150 IE / l).
  • bilirubinindholdet (både generelt og direkte) i blodet overskrides. Hvis niveauet af gul pigment i serum overstiger 27-34 μmol / l, forekommer gulsot (op til 80 μmol / l i mild form, 86-169 μmol / l - i moderat over 170 μmol / l - i svær form).
  • Niveauet af albumin sænkes, koncentrationen af ​​gamma globuliner er tværtimod forøget. Gamma globuliner består af immunglobuliner - antistoffer, der beskytter kroppen mod sygdomsfremkaldende stoffer.
  • øget koncentration af triglycerider i blodet.

PCR-test

Ved hjælp af PCR-teknikken er det muligt at diagnosticere sygdomsfremkaldende middel. Udførelse af denne analyse gør det muligt at opdage en virus i blodet, selvom mængden er minimal. PCR-analysen for hepatitis C gør det muligt at bestemme den eksisterende infektion i blodet allerede efter 5 dage fra infektionsdagen, det vil sige længe før antistoffer fremkommer.

Hvis resultatet af en blodprøve for hepatitis C ved PCR er positiv, indikerer dette forekomsten af ​​en aktiv infektion i kroppen. Ved hjælp af denne metode kan du foretage en kvalitativ og kvantitativ undersøgelse af HVC RNA.

I løbet af den kvalitative analyse af PCR for hepatitis C er det muligt at opdage en eksisterende virus i den menneskelige krop.

Denne diagnostiske procedure udføres, hvis anti-HVC detekteres i blodet.

Dekryptering af analysen for hepatitis C indeholder oplysninger om, at en infektion enten er blevet detekteret eller ikke detekteret i kroppen. Normalt findes der ikke patologiske stoffer i blodet.

Hvis hepatitis C-testen er positiv, betyder det, at patogenet kontinuerligt deler og inficerer levercellerne.

Resultaterne af denne analyse kan være upålidelige, det er muligt i følgende tilfælde:

  • anvendt kontamineret biomateriale;
  • i nærværelse af heparin i blodet;
  • i nærværelse af kemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) i det studerede biomateriale, der påvirker elementerne i PCR.

Kvantitativ analyse af hepatitis C giver information om mængden af ​​virus indeholdt i blodet, det vil sige bestemmer viral belastning. Med dette begreb menes mængden af ​​HVC RNA til stede i blodet (for eksempel i 1 ml). Ved fortolkningen af ​​den kvantitative analyse for hepatitis C udtrykkes denne værdi i digital ækvivalent, målt i IE / ml.

Blod til PCR for hepatitis C tages før terapeutiske foranstaltninger. Efter analysen udføres ved 1, 4, 12 og 24 uger. Undersøgelsen i uge 12 er vejledende og udføres for at vurdere effektiviteten af ​​de medicinske procedurer.

Hvis testen for hepatitis C under graviditeten er positiv og virusværdierne overskrides, øges risikoen for overførsel af patogener fra den syge mor til barnet flere gange. Også med forhøjede værdier af viral belastning er gennemførelsen af ​​terapeutiske foranstaltninger vanskelig.

Ifølge transskriptionen af ​​test for hepatitis C, såfremt virusværdierne overstiger 800.000 IE / ml, så er den høj. Hvis tallene er under 400.000 IE / ml, anses niveauet for viral belastning som lav.

Analyse af hepatitis C ved PCR betragtes som den mest nøjagtige og har flere fordele i forhold til andre forskningsoptioner, nemlig:

  • direkte diagnose af sygdomsfremkaldende middel. Ved udførelse af traditionelle undersøgelser bestemmes af tilstedeværelsen af ​​proteinmarkører, der er affaldsprodukter fra patogener. Dette indikerer kun, at infektionen er til stede i blodet. Ved test af hepatitis C ved PCR er det muligt at bestemme typen af ​​patogen af ​​farlig patologi.
  • specificitet af teknikken. Under denne procedure bestemmes et unikt DNA-område i biomaterialet, der svarer til kun en type patogen. Dette minimerer sandsynligheden for falske resultater.
  • høj følsomhed. Når du udfører PCR-analyse, kan du registrere minimumsværdien af ​​virus. Dette er vigtigt, hvis betingede patogene stoffer identificeres, der kun udgør en trussel, hvis deres niveau stiger.
  • Ved anvendelse af denne teknik i en prøve af biomaterialet kan flere patogener detekteres på én gang.
  • kan registrere skjulte infektioner. Desuden giver analysen dig mulighed for at diagnosticere patogene mikroorganismer, der lever i celler og har høj antigenvariation.

Hvis testresultaterne er positive, så findes spor af viruset i biomaterialet, så netværket har en infektion i kroppen.

En negativ PCR-analyse for hepatitis C betyder, at der ikke er spor af infektion i biomaterialet.

Immunologisk undersøgelse

Denne metode giver dig mulighed for at identificere antistoffer mod alle typer af hepatitisvirus samt antistoffer mod levercellerne i din egen krop, hvis udseende bidrager til udviklingen af ​​autoimmun hepatitis.

Resultaterne opnået under undersøgelsen er relevante i 3 måneder, så skal du donere blod til hepatitis C.

Det er også muligt at udføre en eksplicit undersøgelse ved hjælp af specielle teststrimler. Denne analyse gør det muligt at bestemme antistoffer mod virus C i sammensætningen af ​​blod og spyt. Denne procedure kan udføres uafhængigt hjemme.

Leverbiopsi

For at udføre en sådan analyse tages et element af leveren parenchyma, og en histologisk undersøgelse af det opnåede biomateriale udføres. Dette giver dig mulighed for at vurdere tilstanden af ​​kroppen: at identificere inflammatorisk, nekrotisk foci, stadium af fibrose og så videre.

I dag anvendes test, som erstatter histologisk analyse af hepatisk parenchyma.

For at vurdere stadiet af leverskade og intensiteten af ​​inflammationsprocessen anvendes specifikke venøse blodbiomarkører. Ved hjælp af FibroTest kan du vurdere graden af ​​vækst af fibrøst væv.

Når du udfører Actitest, kan du få information om intensiteten af ​​patologiske processer i leveren parenchyma. Brug af Steatototesta kan diagnosticere fedtvæv i leveren og vurdere omfanget af denne proces. Fibromax består af alle ovennævnte tests og kan omfatte nogle andre undersøgelser.

Forberedelse til undersøgelsen

Hvilke tests er der taget for hepatitis C og hvordan vi har fundet ud af denne eller den slags forskning. Det er lige så vigtigt at vide, hvordan man forbereder sig til analysen.

For at opnå pålidelige resultater anbefales det at overholde følgende krav:

  • Hepatitis C test skal tages om morgenen, på tom mave. Sidste gang mad skal indtages mindst 8 timer før undersøgelsen.
  • Biomaterialet kan indsamles om dagen eller om aftenen. I dette tilfælde er det vigtigt, at mindst 5-6 timer passerer mellem det sidste måltid og analysen.
  • Før du donerer blod til hepatitis C, skal te, kaffe, juice eller andre drikkevarer kasseres, kun vand er tilladt.
  • 48 timer før undersøgelsen er det nødvendigt at udelukke brugen af ​​fede, stegte fødevarer og alkoholholdige drikkevarer.
  • i mindst en time før analysen skal du afstå fra at ryge.
  • Analyse bør ikke udføres umiddelbart efter ultralyd, instrumental, røntgenundersøgelse, massage eller fysioterapi.
  • en dag før gennemførelsen af ​​undersøgelsen er det nødvendigt at udelukke brug af medicin og intensiv fysisk aktivitet. Følelsesmæssig stress er også kontraindiceret.
  • Det anbefales at bruge 15 minutter før undersøgelsen i rolige omgivelser.

Gennemførelse af blodindsamlingsproceduren

Hvor kan man blive testet for hepatitis C? Prøveudtagningen af ​​biomaterialet til videre forskning udføres i laboratoriet på en medicinsk institution eller hos patientens hjem.

Blod fra en vene er taget som følger:

  • Ved hjælp af en speciel tourniquet indpakket omkring patientens underarm, stoppes den venøse blodstrøm. Takket være sådanne manipulationer bliver blodårerne fyldt med blod og vil være mere synlige, hvilket vil gøre det lettere at indsætte nålen.
  • Det område af huden, hvor nålen skal indsættes, behandles omhyggeligt med alkohol eller alkoholholdig væske.
  • En nål indsættes forsigtigt i en vene, så er der monteret et reagensglas, der er specielt designet til at samle blod.
  • Straks efter at nålen er indsat i venen fjernes klemmen fra patientens arm.
  • efter at blodvolumenet, der er nødvendigt for analysen er blevet opsamlet, fjernes nålen forsigtigt fra venen.
  • en steril vatpind eller gasbind, der er fugtet med alkohol, skal påføres på injektionsstedet.
  • For at forhindre forekomst af et hæmatom, skal tamponet presses med en anstrengelse mod nålindsatsområdet, bøj ​​armen ved albuen ledd og hold den i denne position i flere minutter. Sådanne handlinger vil også bidrage til at stoppe blodet hurtigere.

Forudsat at teknikken for intern administration er god, er denne procedure absolut sikker og forårsager ikke smertefulde fornemmelser.

I sjældne tilfælde kan blodårene svulme efter blodindsamling. Dette fænomen kaldes "flebitis". En komprimering (ikke varm) hjælper med at løse problemet, det bør anvendes på opsvulmede områder i huden flere gange om dagen.

Visse problemer kan også opstå, hvis der er en blødningsforstyrrelse. Tager aspirin, warfarin og andre blodfortyndere kan forårsage blødning. Det er derfor, inden du udfører analysen, det er nødvendigt at nægte at tage medicin. Hvis behandlingen ikke kan annulleres, skal du informere specialisten.

Datoer og priser

Hvor meget bliver testet for hepatitis C? Resultaterne af en blodprøve for hepatitis kan være klar om nogle få timer, og om få dage (som regel ikke mere end 8 dage). Varigheden af ​​forberedelsen af ​​resultaterne afhænger af typen af ​​virus og den valgte analysemetode. Hurtigere er undersøgelsen udført ved PCR-metoden. Resultaterne i dette tilfælde vil være klar om få timer.

Hvor meget koster en hepatitis C-test? Afhængigt af klinikken og undersøgelsens kompleksitet kan prisen på proceduren variere fra 400 til 11.000 rubler.

Du bør være opmærksom på, at det kan tage flere uger at danne en tilstrækkelig mængde antistoffer mod HVC. Derfor kan resultatet af en undersøgelse på et tidligt tidspunkt i udviklingen af ​​patologi være falsk-negativ.

Derudover er opnåelse af upålidelige data mulig ved analyse af dårlig kvalitet og overtrædelse af transportbetingelserne for det opnåede biomateriale (prøver skal leveres til laboratoriet i højst 2 timer efter blodprøveudtagning).

Hvis resultatet af studiet er positivt, skal du straks kontakte en smitsom sygeplejerske. Specialisten vil foretage en yderligere undersøgelse og foreskrive den passende behandling.

Gennemførelse af en PCR-analyse for hepatitis C og afkodning af resultaterne

Hepatitis C PCR-analyse er en undersøgelse, hvis hovedformål er at identificere årsagsmaterialets genetiske materiale. Analysen afslører sygdomsfremkaldende middel ved anvendelse af polymerasekædereaktionen. Denne diagnose har en høj grad af nøjagtighed, specificitet til at detektere fravær eller tilstedeværelse af en viral infektion.

Essensen af ​​diagnosen

For at udføre en PCR-analyse til bestemmelse af hepatitis C-viruset fra en patient tages venøst ​​blod, hvilket potentielt indeholder RNA (ribonukleinsyre) HCV af det ønskede virus.

PCR-testen for hepatitis C indebærer proceduren, når følgende tilføjes til patientens blodpartikler:

  • primere (korte kunstigt syntetiserede regioner af det nødvendige gen);
  • specielt enzym (RNA polymerase).

Efter samlingen af ​​biologisk materiale sendes til forskning i laboratoriet. En del af blodet er nødvendigt til direkte PCR-analyse, den anden sendes til undersøgelsen ved ELISA-metoden. Enzymet er i stand til på kort tid at øge antallet af genetisk materiale af patogenens virus. I et specielt apparat udføres flere cykler af varme- og køleprocesser. I det sidste trin sammenlignes det opnåede materiale med virusets gener, og der konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet af patologi i patientens krop.

Essensen og udførelsen af ​​PCR-analyse i laboratoriet. Filmet af SiberianMedicalLaboratory.

Typer af forskning

Der er 3 typer diagnostik, der gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus i kroppen:

  • genotypebestemmelse;
  • kvalitet;
  • kvantitativ.

Kvalitativ metode

Diagnose af hepatitis C med en kvalitativ metode er anvendelig for patienter, i hvilke antistoffer mod virus er påvist i blodprøven. I tilfælde af tilstedeværelsen af ​​den akutte fase af HCV RNA tillader sådanne diagnostiske foranstaltninger at bestemme tilstedeværelsen af ​​sygdommen inden for 1-2 uger efter infektion. I løbet af denne periode kan antistoffer mod hepatitis C endnu ikke udvikles.

Kvantitativ metode

En kvantitativ diagnostisk metode bruges til at bestemme virusets koncentration i blodprøver. En sådan test for viremia (grad af koncentration) gør det muligt præcist at bestemme antallet af enheder af viralt RNA. Slutresultatet udtrykkes i det tilsvarende volumen. Hvis vi taler om kvantitativ analyse, måles indikatorerne i 1 ml (1 cub. Cm).

Den virale belastningsparameter betyder sygdommens infektionsniveau, det vil sige det afspejler graden af ​​"infektiøsitet" af patienten. I praksis betyder det, at jo højere koncentrationen af ​​viruset i blodet er, desto større er chancerne for patienten for at inficere andre med hepatitis C. En kvantitativ metode til forskning giver dig også mulighed for at fastslå kvaliteten og effektiviteten af ​​behandlingen.

genotypebestemmelse

Genotyping afslører mutationer af sygdomsfremkaldende middel. Inden der ordineres en behandlingsplan, bestemmes genotypen af ​​viruset: Behandlingens kvalitet og varighed afhænger af den. For eksempel er effektiviteten ved behandling af sygdom af type I-type 60%, i tilfælde af II, III-type - ca. 80%.

Fordele ved PCR-analyse for hepatitis

Blandt de vigtigste fordele ved proceduren er:

  1. Muligheden for tidlig diagnose. PCR-analyse er i stand til at påvise tilstedeværelsen af ​​et virus i de tidlige stadier af infektion.
  2. Lav fejlresultater. Den studerede biologiske ressource giver dig mulighed for at diagnosticere en del genetisk materiale, som er karakteristisk for kun én type virusinfektion. Denne omstændighed gør det muligt at forhindre falske diagnostiske resultater.
  3. Høj grad af følsomhed. PCR-analyse er i stand til at detektere RNA-virus i små mængder, hvilket også gør det muligt at spore latente infektioner i tide.

Indikationer for

Test for PCR til hepatitis C er nødvendigt, hvis det er muligt:

  • at have kontakt med syge mennesker, hvilket kan føre til infektion;
  • symptomer på levercirrhose (udvidelse af milten, ukarakteristiske ændringer i leverens størrelse, påvisning af venøs plexus på underlivet under huden);
  • positive resultater af ELISA;
  • øget aktivitet af AST og ALT (manifesteret i den biokemiske analyse af blod);
  • behovet for at kontrollere adfærd af antiviral terapi;
  • den indledende fase af behandlingen for behovet for at etablere en viral belastning;
  • gennemfører den endelige fase af terapi for at eliminere mulige tilbagevenden;
  • tilstedeværelsen af ​​hepatitis B i patienten for at udelukke udviklingen af ​​en blandet leverskade.

Sådan forbereder du dig på bloddonation til PCR-undersøgelser

Forberedelse til PCR-analyse omfatter følgende anbefalinger:

  • blod bliver taget om morgenen;
  • analyse udføres på tom mave, så det er tilrådeligt at tage en pause mellem det sidste måltid på 8-10 timer;
  • et par dage før diagnosen bør udelukkes fede, krydrede og stegte fødevarer, alkoholholdige drikkevarer og rygning;
  • en dag før analysen bør man afholde sig fra tung fysisk anstrengelse, udelukke klasser i gymnastiksalen eller swimmingpoolen.

Analyseresultater: normer og afvigelser

Analysen selv er ikke lang tid, og den højt kvalificerede specialist hepatolog eller infektionssygdomme dekrypterer resultaterne af PCR for hepatitis C. På baggrund af analysens resultater diagnosticeres patienten.

For at korrekt dechiffrere resultaterne af undersøgelsen tages følgende indikatorer i betragtning:

  • biokemisk analyse af blod;
  • ultralyddata;
  • biopsi resultater.

Fortolkning af kvantitativ analyse

Når man opnår resultaterne af PCR-kvantitativ analyse, tages følgende indikatorer i betragtning:

Grundlæggende Hepatitis C-test

Viral hepatitis C er et alvorligt medicinsk og socialt problem. Omkring 180 millioner mennesker i verden lider i dag af denne sygdom, 350 tusind mennesker dør hvert år. Langt latent (asymptomatisk) forløb af hepatitis C fører til sen diagnostik. Analyse af hepatitis C udføres med henblik på at diagnosticere sygdommen, differentieret diagnose med hjælp, bestemme den tidligere overførte sygdom "stående". Undersøgelsen anvendes til patienter med symptomer på hepatitis C, forhøjede leverenzymer, ved at indhente oplysninger om tidligere overført hepatitis af uspecificeret etiologi hos personer i risiko og screeningsundersøgelser.

Diagnose af hepatitis C udføres i 2 faser:

Trin 1 Bestemmelse af tilstedeværelsen i serum af antistoffer mod hepatitis C-viruset (anti-HCV).

Trin 2 I tilstedeværelse af anti-HCV udføres en test for tilstedeværelsen af ​​RNA (ribonukleinsyre) ved PCR for hepatitis C. Testen gør det muligt at identificere procesfasen - "aktiv / inaktiv" for at løse problemet med behovet for behandling. Det er kendt, at omkring 30% af de personer, der er inficeret med hepatitis C-virus, slippe af med infektionen alene, da de har et stærkt immunsystem og ikke behøver behandling. Brug af PCR bestemmes af virusets genotype. Forskellige genotyper reagerer forskelligt på behandling.

Graden af ​​leverskader i hepatitis C bestemmes ved anvendelse af en biopsi eller andre invasive og ikke-invasive test (fx fibrotest). Graden af ​​leverstatatose bestemmes af steatotesta. I alle tilfælde bør diagnosen hepatitis C være baseret på data fra den epidemiologiske undersøgelse, sygdommens klinik og dataene om biokemiske blodprøver.

Fig. 1. Alvorlige virkninger af viral hepatitis C-intens ascites.

Hepatitis C test: anti-HCV

Anti-HCV-antistoffer (anti-HCV) er specifikke markører for infektion. I kroppen af ​​en syg person produceres specifikke antistoffer til proteinerne fra hepatitis C-viruset (antigenerne) - immunoglobuliner af klassen IgM og IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Efter modtagelse af et positivt resultat for antistoffer mod hepatitis C-viruset udføres en bekræftende test - bestemmelse af totale antistoffer mod strukturelle og ikke-strukturelle proteiner af viruset. De strukturelle kappeproteiner af El- og E2-vira produceres af anti-HCV IgM, nucleocapsidprotein C-cor (anti-HCV IgG) og 7 ikke-strukturelle proteiner-enzymer af NS-anti HCV NS IgG.

Til påvisning af antistoffer mod hepatitis C-viruset anvendes enzymbundet immunosorbentassay (ELISA). Bekræftende tests - RIBA (rekombinant immunoblotting), mindre ofte Inno-Lia (analyse af syntetiske peptider) bruges til at bekræfte (+) ELISA-resultater.

Anti HCV IgM

  • HCV IgM antistoffer optræder i serum 4-6 uger efter infektion og hurtigt nå et maksimum. Ved afslutningen af ​​den akutte proces (efter 5-6 måneder) falder deres koncentration.
  • Langsigtet registrering af tilstedeværelsen af ​​anti-HCV IgM indikerer, at hepatitis C har erhvervet et kronisk forløb.
  • Forøgelsen i niveauet af IgM i perioden med kronisk hepatitis C indikerer reaktivering af den infektiøse proces.
  • Niveauet af IgM immunoglobuliner giver dig mulighed for at vurdere effektiviteten af ​​behandlingen.

Anti HCV IgG

HCV IgG antistoffer optræder i patientens serum 11-12 uger efter infektion. På 5-6 måneder registreres peak koncentrationen. Næste antistoffer

forbliver på et konstant niveau igennem sygdommens varighed i den akutte periode og i genopretningsperioden.

Samlede antistoffer mod hepatitis C-virus

Samlede antistoffer mod hepatitis C-viruset (anti-HCV-total) anvendes til at diagnosticere "friske" tilfælde af sygdommen. Samlede antistoffer er antistoffer mod nucleocapsidproteinet C-cor (anti HCV IgG) og 7 nonstructural NS protein enzymer (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, anti HCV NS4 og anti HCV NS5.

Samlede antistoffer mod hepatitis C-viruset optræder i den inficerede persons serum efter 11-12 uger fra starten af ​​infektionen, når en top med 5 til 6 måneder og forbliver på et konstant niveau i hele sygdomsperioden i den akutte periode og i 5 til 9 år efter genopretningsperioden.

Hver af antistoffetyperne har en uafhængig diagnostisk værdi:

  • AntiHCVC (cor) er de vigtigste indikatorer for kontakt med hepatitis C.
  • AntiHCVNS3 påvist en af ​​de første i seroconversionsprocessen (produktion af antistoffer som reaktion på tilstedeværelsen af ​​viruset), angiver sværhedsgraden af ​​den infektiøse proces og angiver en høj viral belastning. Med deres hjælp bestemmes arvelig hepatitis C hos patienter, der ikke har mistanke om forekomsten af ​​infektion. Langvarig tilstedeværelse af anti-HCV NS3 i serum indikerer en høj risiko for kroniskhed af processen.
  • AntiHCVNS4 antyder, at den smitsomme proces har et langt forløb. Niveauet af antistoftitre kan bedømmes efter graden af ​​leverskade.
  • AntiHCVNS5 indikerer tilstedeværelsen af ​​viralt RNA. Deres opdagelse i den akutte periode er en forløber for procesens kroniske karakter. Høje antistoftitere på baggrund af behandlingen antyder, at patienten ikke reagerer på behandlingen.
  • AntiHCVNS4 og antiHCVNS5. Denne type antistoffer forekommer i de sene stadier af udviklingen af ​​hepatitis. Deres reduktion indikerer dannelsen af ​​remission af den infektiøse proces. Efter behandling reduceres titrene af anti-HCV NS4 og anti-HCV NS5 inden for 8 til 10 år. Denne type antistof beskytter ikke mod reinfektion.

Fig. 2. Macrodrug af en lever. Levercirrhose i hepatitis C.

Dekodningsanalyse for hepatitis C

Fraværet af antistoffer mod hepatitis C-viruset er angivet med udtrykket "Norm". Dette betyder imidlertid ikke altid, at sygdommen ikke er til stede hos mennesker. Således registreres fraværet af antistoffer i blodet af en inficeret person, indtil de optræder i blodet - op til 6 måneder fra infektionsdagen (i gennemsnit 12 uger). Perioden for fravær af antistoffer i blodet af en inficeret person kaldes et "serologisk vindue." 3. generations testsystemer (ELISA-3) har høj specificitet (op til 99,7%). Ca. 0,3% tegnede sig for falske positive resultater.

Tilstedeværelsen af ​​anti-HCV indikerer en nuværende infektion eller tidligere infektion.

  • Påvisning af IgM antistoffer og anti HCV Cor Cor IgG, stigning i titere af anti HCV Corue IgG og (+) PCR resultater i nærvær af kliniske og laboratorie tegn på akut hepatitis indikerer en akut periode af sygdommen.
  • Påvisning af anti-IgM, anti-HCV Corue IgG, anti-HCV NS IgG og (+) PCR resultat i tilstedeværelsen af ​​kliniske og laboratorie tegn på hepatitis indikerer reaktivering af kronisk hepatitis C.
  • Påvisning af anti-HCV Coré IgG og anti-HCV NS IgG i mangel af kliniske og laboratorie tegn på hepatitis og et negativt PCR resultat indikerer at patienten har kronisk hepatitis i latent fase.

Fig. 3. Macrodrug i en lever. Primær levercancer. En af grundene til udviklingen af ​​onkologi er levercirrhose, udviklet på baggrund af kronisk hepatitis C.

PCR-analyse for hepatitis C

Polymerasekædereaktion (PCR) er "guldstandarden" til diagnosticering af viral hepatitis C. Testets høje følsomhed gør det muligt at påvise det genetiske materiale af virus (RNA), selv om der kun er få af dem i det undersøgte materiale. PCR er i stand til at detektere RNA-vira længe før forekomsten af ​​antistoffer i serumet, men ikke tidligere end den femte dag fra infektionsdagen. Når en sygdom detekteres ved PCR, detekteres RNA-vira ikke kun i serum, men også i leverbiopater.

  • Polymerasekædereaktion gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af hepatitis C-vira i blodet og bestemme om behandlingens start. Det er kendt, at op til 30% af patienterne slippe af med infektionen selv, da de har et stærkt immunforsvar og ikke behøver behandling.
  • Hepatitis C PCR bruges til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen.
  • PCR anvendes i mangel af antistoffer i blodet, men i nærvær af stærke mistanker om hepatitis C (forhøjede niveauer af alkalisk fosfatase, totalt bilirubin, 2 gange overskud af lever enzymer AST og ALT).
  • PCR-analyse for hepatitis C anvendes til at kontrollere intrauterin transmission af hepatitisvirus.

Hepatitis C viral belastning

Ved hjælp af PCR-analysen er det muligt at bestemme ikke kun forekomsten af ​​virus RNA i blodet - en kvalitativ analyse (detekteret / ikke detekteret), men deres antal - viral belastningen (antallet af enheder af viralt RNA i 1 ml blod). Kvantitativ indikator PCR bruges til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen af ​​hepatitis C.

De metoder, der anvendes til PCR, har forskellig følsomhed. I Den Russiske Føderation anbefales det i overensstemmelse med metodologiske anbefalinger fra 2014 at anvende metoder, der har en følsomhed på 25 IE / ml eller mindre. Ifølge anbefalingerne fra den europæiske sammenslutning for leverundersøgelsen i 2015 foreslås det at anvende metoder til bestemmelse af viralt RNA med en følsomhed på 15 IE / ml eller mindre.

Afhængigt af testsystemets følsomhed modtager patienten et eller andet resultat af undersøgelsen:

  • COBAS AMPLICOR analysatorens mindste følsomhed er 600 IE / ml (analysatoren af ​​den gamle generation).
  • HCB-TEST COBAS AMPLICOR analysatorens mindste følsomhed er 50 IE / ml, hvilket er 100 eksemplarer pr. Ml.
  • HCV RealBest RNA-analysatorens mindste følsomhed er 15 IE / ml, som er 38 eksemplarer pr. Ml (inkluderet i gruppen af ​​moderne testsystemer). Specificiteten af ​​disse analysatorer er 100%. Med deres hjælp detekteres RNA'er af hepatitis C-vira af subtyperne 1a og 1b, 2a, 2b, 2c og 2i, 3, 4, 5a og 6.

Hvis der er kopier af RNA under følsomhedstærsklen for denne analysator, modtager patienten svaret "ikke detekteret".

Fig. 4. Et eksempel på PCR-analyse (kvantitativ test). Den virale belastning bestemmes for hepatitis C.

Fortolkning af resultaterne af PCR-analyse for hepatitis C

  • Fraværet af RNA-virus indikerer fraværet af infektion.
  • Fraværet af RNA mod tilstedeværelsen af ​​antistoffer i blodet indikerer forsvinden af ​​hepatitis C-viruset under påvirkning af behandling eller med selvhelbredelse.
  • I nogle tilfælde er viruset til stede i blodet, men på subliminale niveauer, når koncentrationen ikke er fanget af analysatorer. Sådanne patienter forbliver farlige med hensyn til infektion.
  • Påvisning af RNA-virus i 6 på hinanden følgende måneder hos patienter med akut hepatitis C antyder, at sygdommen har taget et kronisk forløb.
  • Reduktion af viralt RNA under behandling indikerer effektiviteten af ​​behandlingen og omvendt.

Fig. 5. Fed hepatose. En af årsagerne til leverskade er viral hepatitis C.

Grundlæggende biokemiske blodprøver for hepatitis C

Biokemiske blodprøver hjælper med at etablere funktionelle tilstand for mange menneskelige organer og systemer.

Hepatiske enzymer ALT og AST

Hepatiske enzymer syntetiseres intracellulært. De er involveret i syntese af aminosyrer. Et stort antal af dem findes i cellerne i lever, hjerte, nyrer og skeletmuskler. Med organernes nederlag (krænkelse af cellemembranernes integritet) kommer enzymerne ind i blodet, hvor deres niveau stiger. Forhøjede niveauer af enzymer registreres under nederlaget (lysis, destruktion) af leverceller, myokardieinfarkt og andre sygdomme. Jo højere niveauet af transaminaser i serum, desto flere celler blev ødelagt. ALT dominerer i leverceller, AST - i myokardceller. Ved ødelæggelsen af ​​leverceller øges niveauet af ALT 1,5 - 2 gange. Ved ødelæggelsen af ​​myokardceller øges niveauet af AST med 8 - 10 gange.

Ved diagnosticering af kronisk viral hepatitis er det nødvendigt at være opmærksom på AST / ALT-forholdet (de Ritis-koefficienten). Et overskud af AST over ALT indikerer levercellebeskadigelse.

  • AST-normen for mænd er op til 41 enheder / l, kvinder - op til 35 enheder / l, børn over 12 år - op til 45 enheder / l.
  • Normen for ALT for mænd er op til 45 enheder / l, kvinder - op til 34 enheder / l, børn 12 år og ældre - op til 39 enheder / l.
  • Normalt (hos raske mennesker) varierer AST / ALT-forholdet fra 0,91 - 1,75.

bilirubin

Bilirubin er et nedbrydningsprodukt af hæmoglobin. Bilirubin i blodet findes i form af indirekte (op til 96%) og direkte (4%). Processen med dekomponering af dette stof forekommer hovedsageligt i leverenes celler, hvor den udskilles fra kroppen med galde. Ved ødelæggelsen af ​​leverceller øges niveauet af bilirubin i serum. Normalt er det samlede bilirubinindhold mindre end 3,4 - 21,0 μmol / L. På et niveau på 30-35 μmol / l og derover trænger bilirubin ind i vævene, hvorved huden og sclera bliver gulsot.

Fig. 6. Når hepatitis C i blodet øger niveauet af bilirubin. Stoffet trænger ind i vævet, hvorfor hud og sclera bliver gulsot.

PCR diagnostik for hepatitis C

Hepatitis C er en betændelse i levercellerne, der opstår som følge af infektion med HCV-viruset (hepatitis C) ved kontakt med blod fra en inficeret person. Den genetiske kode for flavivirus HCV bæres af et RNA (ribonuclensyre) molekyle indeholdt i virusets struktur. Dette livstruende fænomen er kendetegnet ved hemmeligholdelse i den første fase af patologien. Tidsintervallet mellem infektion og symptompåvirkningen (immunsystemets reaktion) kan være fra en måned til seks måneder. Som regel tager sygdommen en kronisk form og er svær at helbrede.

Moderne medicin giver dig mulighed for at diagnosticere patologi med mindre leverskade. De mest almindelige og effektive diagnostiske metoder omfatter PCR-analyse. Overvej i denne artikel, hvad det er, og hvilke former der findes.

Hvad er undersøgelsen

PCR-analyse for hepatitis C er en laboratorieundersøgelse, der registrerer flavirus, det genetiske materiale af ribonukleensyre (RNA). Det bestemmer antallet af RNA molekyler i blodet, kvaliteten af ​​det biologiske materiale, den genetiske type HCV flavirus.

PCR-metoden for hepatitis C gør det muligt at registrere minimumsværdien af ​​flavirus før dannelsen af ​​antistoffer som regel kort efter infektion.

Undersøgelsen omtales ofte som RNA-analyse, da den detekterer ribonukleinsyrepartikler med en størrelse på 30-60 nm indeholdt i et flavavirus.

Undersøgelsen udføres som følger: På en tom mave giver patienten blod fra en vene, som derefter testes ved forskellige metoder:

  • Real-Time PCR udføres på en lukket automatiseret måde og har en lavere grænse for detektion af RNA-vira på 15 IE / ml;
  • COBAS AMPLICOR med en følsomhed på 50-100 IE / ml.

Jo højere tærsklen for følsomhed for en diagnostisk teknik er, des større er chancerne for at detektere det laveste virusindhold i det biologiske materiale, der er under undersøgelse.

Hvilke typer analyser anvendes

En analyse, der har været anvendt i flere årtier, hedder PCR-hepatitis, og det kan detekteres ret let og hurtigt. I medicin er der to metoder til reaktion, fundamentalt forskellige fra hinanden:

  • kvalitative metode afslører tilstedeværelsen i det biologiske materiale af den genetiske kilde til en bestemt virus;
  • kvantitativ analyse måler antallet af genetiske stoffer, som gør det muligt at bestemme scenen i patologien eller at evaluere effektiviteten af ​​det terapeutiske kursus
  • genotyping bestemmer hvilken type virus der er til stede i kroppen.

Generelt hjælper en blodprøve med at identificere viremias natur og patogenens genetiske type. Undersøgelsen udføres som regel 1 gang afhængigt af graden af ​​følsomhed i diagnosesystemet. Om nødvendigt udføres retesting ved anvendelse af et ultrasensitivt reagens.

PCR af høj kvalitet

Hvad er højkvalitets PCR RNA for hepatitis C? Essensen af ​​reaktionen ligger i nærvær af hepatitis-RNA-sekvensen, og reaktionen er kun mulig i nærvær af virale proteiner med en lignende etymologi i ELISA. I sammenligningsprocessen detekteres belastningen og mulig skade på leverområdet.

Et særpræg ved denne metode er evnen til at detektere selv tilstedeværelsen af ​​et separat gen.

Det skal bemærkes, at patienten efter at have modtaget resultaterne af PCR- og ELISA-testene har brug for passende behandling, uanset hvad resultatet af det endelige enzymimmunoassay var. Positiv indikerer infektion, og PCR-negativ angiver et reduceret antal virale partikler i forhold til følsomhedsniveauet.

Der er flere forhold, som påvirker produktionen af ​​en negativ PCR og ELISA:

  • manglen på passende betingelser for indsamling af materiale
  • den resulterende analyse indeholder kontaminering;
  • i tilfælde af en tidlig injektion af heparin til patienten.

På patientens side er det ikke nødvendigt at overholde visse regler for blodprøveudtagning til PCR-analyse. I dette tilfælde afhænger kvaliteten af ​​denne analyse af den medicinske professionel, der udfører proceduren. Evnen til at fastslå sygdommens tilstedeværelse (især i den akutte form) fremkommer inden for få uger efter infektion.

Kvantitativ analyse

En kvantitativ test anbefales til at detektere viral belastning umiddelbart inden dannelsen af ​​yderligere terapi og kroppens reaktion. Processen med blodprøveudtagning udføres på lignende måde som med højkvalitets PCR og ELISA, den eneste betingelse er manglen på at ryge patienten før proceduren.

Hvad angår egenskaberne ved de data, der er opnået som et resultat af undersøgelsen, er den forøgede belastning karakteriseret ved indikatorer fra 800000 IE / ml, lav - 400000 IE / ml. Tilstedeværelsen af ​​et virus i patientens krop er angivet ved PCR for hepatitis er ikke en negativ kvalitativ test.

Denne form for forskning gør det muligt at bestemme, hvor farlig patienten er for de mennesker omkring ham. For eksempel indikerer identifikationen af ​​et højt niveau en øget infektivitet hos patienten. Desuden bidrager analysens resultater til at formulere den mere effektive behandling og bestemme, hvor meget den eksisterende behandling anses for effektiv.

Testets hurtige negative respons indikerer succesen for den valgte teknik, og den langsomme indikerer behovet for justeringer og brugen af ​​forskellig behandling.

Processen med at tage analyseproceduren afhænger af sygdommens specifikke dag. Den første bestemmelse udføres den første dag efter patientens adgang til hospitalet, så gentages proceduren 4, 12 og 24 uger efter at have taget medicin.

En kvantitativ analyse viser således, hvilken behandling der er den mest effektive, varigheden af ​​den tilgængelige behandling og patientens fare i forhold til andre mennesker.

genotypebestemmelse

I undersøgelsen af ​​materialeanalyse er det vigtigt at bestemme nøjagtigheden af ​​virusets genotype, som finder sted. I øjeblikket er der 11 sorter af hepatitis C-viruset, som igen indeholder visse underarter.

Alle disse arter reagerer forskelligt på forskellige behandlinger, og enkelte arter er absolut resistente overfor mange lægemidler.

Genotypen gør det muligt at bestemme og vise leverets tilstand. Det er ikke ualmindeligt, at resultaterne registreres "ikke skrevet", hvilket betyder at viruset i patientens blod ikke påvises af dette testsystem. Dette kan detekteres, hvis en bestemt genotype ikke svarer til denne zone. I en sådan situation tages analysen gentagne gange, og et mere følsomt system bruges til at studere materialet.

Ultrafølsom metode

Den ultrasensitive metode er nødvendig i visse tilfælde, når diagnosen hepatitis ikke kan udføres ved hjælp af andre metoder, og når man skal tage en analyse, bestemmes den behandlende læge:

  • i tilfælde af mistanke om forekomsten af ​​hepatitis C-virus hos patienter med latent type sygdom
  • tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod hepatitis C-viruset, ikke bekræftet ved PCR-diagnostik;
  • for at bestemme kvaliteten af ​​effektiviteten af ​​den valgte behandlingsmetode og bekræfte elimineringen af ​​sygdommen.

Sensibiliteten af ​​denne metode er meget højere end de almindeligt anvendte, men denne metode udelukker ikke at opnå falske resultater, både positive og negative. I en sådan situation er det vigtigt at kontrollere procedurens kvalitet og muligheden for kontaminering af selve materialet.

Forklaring af PCR-analyse

Afkodningen af ​​analysen udføres på basis af de fremlagte materialer, medens resultaterne af laboratorieundersøgelser indbefatter visse data beskrevet ovenfor.

Dekodning kan omfatte en positiv PCR-polymerasekædereaktion og en negativ ELISA i analysen, hvilket betyder at patienten ikke har tegn på hepatitis C i blodet, men tidligere har han overført den akutte form af sygdommen. Som regel benytter specialisterne ved diagnosticering anvendelse af PCR testindikatorer.

Sammenfattende ovenstående kan det konkluderes, at det under analysen er vigtigt at følge alle regler og anbefalinger, så de opnåede resultater er så nøjagtige som muligt, og på grundlag af de opnåede data er det muligt at bestemme effektiviteten af ​​den anvendte terapi og den yderligere chance for fuldstændig genopretning.

PCR-analyse for hepatitis C

Ved diagnosen "kronisk viral hepatitis C (CVHS)" kræves en omfattende undersøgelse af personen, som omfatter kliniske, laboratorie- og instrumentelle undersøgelser. Vigtigt ud fra diagnosens synspunkt for den korrekte diagnose er PCR-metoden - polymerasekædereaktion.

Hvad viser denne analyse og hvorfor er det nødvendigt?

Denne laboratoriemetode registrerer hepatitis C-virus-RNA i humant blod. Sammen med enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) til antistoffer mod viruset anvendes PCR til at diagnosticere CVHC og genotypen af ​​dets patogen. Denne forskning er en af ​​de nyeste metoder til laboratoriediagnostik. Dens pålidelighed ved CVHS overstiger 97%, hvilket betragtes som en meget god indikator for forskning.

Der er tre blod-PCR-analyser til CVHC: kvalitativ, kvantitativ og virusgenotyping. Den første undersøgelse (kvalitativ analyse) af en virus registrerer det i blodet og bruges derfor kun til diagnose.

Den anden (kvantitative) undersøgelse bestemmer graden af ​​viral belastning på kroppen, derfor bruges til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen.

Den tredje PCR (genotyping) præciserer diagnosen, der etablerer virusets genotype, hvilket er meget vigtigt for udnævnelsen af ​​korrekt antiviral behandling.

Kernen i polymerasekædereaktionsteknikken er brugen af ​​enzymer, som multiplicerer patogenets genetiske materiale i biomaterialet. Under processen med sådan replikation opvarmes røret med blod flere gange og afkøles til den temperatur, der kræves for at accelerere den enzymatiske reaktion. Som et resultat af disse manipulationer øges mængden af ​​det virale genom mange gange, så det kan detekteres selv med en minimal mængde.

PCR-diagnostik har mange fordele i forhold til andre laboratorieprøver:

  • høj følsomhed - 97-98%;
  • garanteret analytisk specificitet (afslører nøjagtigt det patogen, du vil finde, og ikke dets relaterede stamme);
  • Gennemførelseshastighed (det tager ikke mere end 2 dage at få en konklusion).

Tre typer PCR-assays

Højkvalitets PCR-analyse er tildelt alle patienter, i hvem ELISA-analyse har påvist antistoffer mod HVGS-viruset. Efter udførelse af højkvalitets-PCR kan to svarmuligheder opnås: "RNA er detekteret" eller "RNA registreres ikke." For at detektere den mindste mængde virus i blodet, er der brug for testsystemer med en følsomhed på mindst 50 IE / ml. Hvis koncentrationen af ​​viruset i patientens blod er mindre end det diagnostiske stof kan bestemme, kan resultatet af undersøgelsen være falsk negativt. For at undgå en sådan diagnostisk fejl skal laboratorier, der udfører PCR-diagnostik, være forsynet med meget følsomme testsystemer. I laboratoriet "Invitro" anvendes f.eks. Test med en følsomhed på 15 IE / ml. Laboratoriearbejdere er forpligtet til at give oplysninger om testens følsomhed til patienter og læger efter deres første anmodning.

Kvantitativ analyse af PCR bestemmer graden af ​​viremia, det vil sige koncentrationen af ​​patogenet i blodet, viral belastning. Resultatet af denne undersøgelse er i modsætning til højkvalitets PCR udtrykt i tal, for eksempel 2 x 10 * 6 IE / ml, hvilket betyder 2 millioner internationale enheder i 1 ml blod. Nogle laboratorier bruger en anden indikator - antallet af kopier / ml. Disse to indikatorer er nemme at konvertere: 1 international enhed svarer til 4 kopier af RNA. Således betyder 2 x 10 * 6 IE / ml at 8 × 10 * 6 kopier af viralt RNA i 1 ml, dvs. 8 millioner eksemplarer i 1 ml blod.

Genotyping er definitionen af ​​en af ​​de seks genotyper af en virus. Det kliniske billede, udviklingsgraden af ​​leverkomplikationer og prognosen for patientens fremtidige liv afhænger af kausionsmiddelets genotype. Genotypen af ​​viruset er meget vigtig allerede i diagnosticeringsfasen, da kombinationen af ​​lægemidler og varigheden af ​​det terapeutiske forløb, der skal tildeles patienten, afhænger af dets korrekte bestemmelse.

Men selv denne tilsyneladende "perfekte" laboratorieforskning har sine ulemper:

  • undersøgelsen replikerer det genetiske materiale af alle patogener, endog ikke-levende, hvilket kan fordreje resultatet. For at overvåge effektiviteten ved hjælp af PCR udføres der derfor en reanalyse ikke tidligere end 2 måneder efter den forrige, således at de døde vira kan "forlade" patientens krop;
  • En del af det virale genom, der bestemmes ved hjælp af testsystemer, kan teoretisk være til stede i andre vira eller mikroorganismer, så der er mulighed for falsk positivt respons;
  • vira muterer hurtigt. Sommetider er hastigheden og omfanget af virusmutation så høj, at testsystemet stopper med at fange deres genom. Som et resultat er et falsk negativt resultat muligt.

For at udjævne disse mangler foretager producenter af laboratorietestsystemer til PCR-diagnostik hele tiden deres test, herunder krydsreaktioner og følsomhed overfor en bestemt genotype af virusen.

Hvordan man tager en PCR-test for hepatitis C?

For at indgå en PCR-undersøgelse skal være pålidelig, er det nøje at følge reglerne for forberedelsen af ​​dets adfærd:

  • forskning udføres på tom mave (glukose, fedtstoffer, mineraler, der indtræder i blodet fra fødevarer, kan påvirke enzymreaktionens hastighed og kvalitet);
  • kløften mellem det sidste måltid og blodprøveudtagningen til analyse bør være mindst 8 timer;
  • På tærsklen til undersøgelsen er det forbudt at tage alkohol og forbruge fede fødevarer, hvis elimineringstid er langvarig;
  • en dag før du går til laboratoriet bør undgå stærk fysisk og følelsesmæssig stress;
  • indtil blodprøveudtagning ikke anbefales at ryge.

For at undgå udfald af falske konklusioner skal den påståede patient komme til laboratoriet lidt tidligere, end blodet vil blive taget. Det tager 15-20 minutter for en person at tage vejret, roe sig ned. Adrenalin, som er til stede i blodet efter en hurtig tur, kan påvirke resultatet af undersøgelsen.

Hvis patienten bliver henvist til analyse, tager der medicin, skal han underrette lægen herom. Det er muligt, at nogle af dem skal nægtes i et stykke tid (hvis muligt).

Resultatet af analysen af ​​PCR for hepatitis C

Afkodning af resultaterne involveret i laboratorielægen på laboratoriet, der gennemførte analysen. Dekodning er definitionen af ​​afvigelsen af ​​resultatet opnået fra normen. Indikatorhastigheden er etableret direkte af producenten af ​​testsystemet, som bruges af laboratoriet til diagnostik. Det er derfor ikke overraskende, at virusbelastningen i nogle laboratorier bestemmes i IE / ml og i andre i kopier / ml.

Efter at have opnået konklusionen er det nødvendigt at kunne fortolke det korrekt. Behandlingen af ​​resultaterne af undersøgelsen skal udføres af den behandlende læge hos patienten med hepatitis C. Først efter en objektiv, instrumentel og laboratorieundersøgelse af patienten kan lægen opnå en tilstrækkelig mængde data til korrekt fortolkning af de opnåede PCR-resultater.

Evaluering af kvalitativ analyse giver som regel ikke problemer, selv hos patienter. Resultatet der kan kun være en: "detekteret" eller "ikke detekteret". I dette tilfælde er den anden af ​​dem normen.

Indikatorer for kvantitativ analyse er vanskeligere at fortolke. Det viser graden af ​​viral belastning på patienten. Selv blandt hepatologer er der ingen konsensus om, hvordan man skal behandle det påvist viremia. De fleste læger er tilbøjelige til at tro på, at en høj belastning på mere end 8 × 10 * 5 IE / ml bør overvejes. En belastning på mere end 1 × 10 * 7 IE / ml betragtes som meget høj, mens en lav belastning er mindre end 4 × 10 * 5 IE / ml.

Graden af ​​viral belastning antyder virulens (aggressivitet) af viruset: Jo større dets mængde i blodet, jo hurtigere kan komplikationerne af leveren udvikle sig. En høj koncentration af viruset i en gravid kvindes blod øger sandsynligheden for dens indtrængning gennem hæmato-placental barrieren mod fosteret. Viremia påvirker også effektiviteten af ​​behandlingen: med lavt tal er effektiviteten af ​​behandlingen højere end hos de høje.

For at være sikker på nøjagtigheden af ​​analysen af ​​PCR for hepatitis C, er det kun at foretrække kun de laboratorier, der har fungeret godt. Prispolitik i dette tilfælde bør ikke spille en primær rolle.


Flere Artikler Om Lever

Hepatitis

Billige analoger og stofsubstitutter Ursofalk til børn og voksne

Ursulfak lægemiddel foreskrevet for sygdomme i leveren og galdeblæren. Brugsanvisningen er en komplet liste over sygdomme. Desuden er stoffet egnet til stagnation af galde.
Hepatitis

Narkotika til behandling af fedtlever

Fedt hepatose (ikke-alkoholisk fedtsygdom, steatose, fedtinfiltration) er en tilstand, der er karakteriseret ved ophobning af fedtceller i leveren. Så er mere end 5% af kroppens masse fedtstoffer.